Проводят посев отделяемого с поверхности язв на среду Сабуро и через 3-4 недели появляется медленно растущая колония от оливково-зеленого до черного цвета. Ввиду трудоемкости и длительности использование данного метода ограничено.
Гноя позволяет обнаружить сферические тельца, похожие на английские пенсы. При исследовании корок, чешуек и гноя можно обнаружить также гифы.
Псевдоэпителиоматозная гиперплазия эпидермиса, гиперкератоз, внутриэпидермальные абсцессы, содержащие сферические тельца и нейтрофилы. В сосочковом и подсосочковом слоях дермы имеется густой инфильтрат, состоящий из отдельных очагов, в центре которых расположены микроабсцессы, содержащие споры гриба в виде сферических телец коричневого цвета (напоминают английские монеты – пенсы). В окружности микроабсцессов инфильтрат представлен лимфоцитами, плазмоцитами, эпителиоидными и гигантскими клетками, в последних могут также обнаруживаться сферические тельца.
Обычно основывается на клинической картине, данных анамнеза (травма гнилым деревом), данных микроскопии и гистологического исследования.